進行磁珠分選有哪些操作要求
更新時間:2022-07-11 點擊次數(shù):1925
磁珠分選,也被稱為免疫磁珠細胞分選,包括使用針對特定細胞表面抗原的抗體標記細胞進行選擇或去除。被標記的細胞與磁珠交聯(lián),一旦被置于磁場中,即可被吸附。
免疫磁珠分選有兩種方式:有柱式分選和無柱式分選。
操作磁珠分選有哪些要求
1 移液槍吸取液體要準確
2 移液槍的槍頭在吸取磁珠或者抗體的時候,槍頭要剛好伸進液面以下,不要伸到瓶子底部,以免槍頭沾了過多的試劑,再帶到了細胞懸液中
3 磁珠使用前要渦旋混勻
4 磁極插入細胞懸液5min之后,轉移細胞的時候,特別是最后一滴細胞懸液,如果滴不下來,不要晃動磁極,這樣會降低細胞和磁極的吸附,進而降低純度?;蛘咦詈笠坏渭毎梢圆灰?。
5 細胞和磁珠,以及細胞和抗體的孵育時間,以及分選的步數(shù)請遵循protocol,因為protocol是經(jīng)過優(yōu)化的方案。
6重復一次分選可提高收率,對純度影響不大。每分離一次,收益率通常會增加約8-10%,純度降低1-2%。
7 Mojosort Buffer需要提前插入冰中預冷。
8 磁極下面有一部分沒有磁極,注意把流式管往上頂一頂,使得細胞懸液充分在磁極區(qū)域。